מאגר זה משמש לחקר תנועת ה- DNA
למאגר זה יש כוח יוני נמוך ויכולת חציצה נמוכה. זה מתאים במיוחד אלקטרופורזה של גדול (> 20 KB) חתיכות של DNA ויהיה צורך להחליף לעתים קרובות או recirculated במשך יותר (4 שעות) ג 'ל לרוץ פעמים.
עם זאת בחשבון, ייתכן שתרצה לשקול כמה אצוות של המאגר.
בהתחשב בכך המאגר קל לעשות את הצעדים ניתן לבצע במהירות, ביצוע יותר אצווה אחת בכל פעם לא צריך להיות זמן רב במיוחד או קשה לשלוף. באמצעות ההוראות שלהלן, זה צריך לקחת רק 30 דקות כדי להפוך את מאגר TAE. כך:
הכן פתרון צילומים של EDTA
EDTA (אתילנדיאמין tetraacetic חומצה) פתרון מוכן מראש. EDTA לא ילך לחלוטין לתוך פתרון עד ה- pH מותאם עד 8.0. עבור פתרון 500 מיליליטר המניות של 0.5 M EDTA, לשקול את 93.05 גרם של מלח EDTA דיגודיום (FW = 372.2). ממיסים 400-milliliters מים deionized ולהתאים את ה- pH עם hydroxide נתרן (NaOH). למעלה את הפתרון נפח סופי של 500 milliliters.
להעיף פתרון צילומים של TAE
הפוך פתרון מרוכז (50x) מלאי של TAE על ידי שקילה של 242 גרם של בסיס Tris (FW = 121.14) ו המסת זה כ 750 מיליליטר של מים deionized.
בזהירות להוסיף 57.1 milliliters של חומצה קרחונית ו 100 milliliters של 0.5 M EDTA (pH 8.0). לאחר מכן, להתאים את הפתרון נפח סופי של 1 ליטר. פתרון זה מלאי ניתן לאחסן בטמפרטורת החדר. ה- pH של מאגר זה אינו מותאם ועליו להיות בערך 8.5.
הכן פתרון עבודה של TAE
הפתרון עובד של חיץ 1x TAE נעשה על ידי פשוט דילול פתרון המניות על ידי 50x במים deionized.
ריכוז סופי המומס הם 40 מ"מ. Tris-acetate ו 1 מ"מ EDTA. המאגר הוא כעת מוכן לשימוש בניהול agarose ג'ל.
מה שאתה צריך בשביל המאגר
מאז ביצוע המאגר TAE רק דורש הוראות מהירה ופשוטה של הוראות, מספר החומרים הדרושים זה לא מוגזם. אתה רק צריך EDTA דיסודיום מלח, בסיס Tris, חומצה אצטית קרחוני.
ביצוע המאגר גם דורש מטר pH ו כיול סטנדרטים, לפי הצורך. אתה גם צריך 600 milliliter ו 1500 milliliters כוסות או צלוחיות וכן צילינדרים מדורגים. לבסוף, תצטרך מים deionized, מערבבים בארים, ומערבבים צלחות.
מסיימים
היכן אתם מתכננים ליצור את המאגר - באתר בית ספר, באתר עבודה או במיקום אחר, כגון הבית? בדוק את המלאי לפני שתתחיל לוודא שיש לך את כל החומרים הנ"ל למאגר TAE.
אם אתה מעדיף לא לשלם עבור חומרים, בחירה להפוך את המאגר מחוץ לבית שלך מומלץ. אתה יכול בקלות להזמין את החומרים שאתה צריך באינטרנט או לבקר בחנות המומחיות עבורם.