מאגרים אלה יכולים לשמש עבור יישומים ביולוגיים ליד pH נייטרלי
שלושת ערכי pKa עבור חומצה זרחתית (מתוך מדריך CRC של כימיה ופיזיקה) הם 2.16, 7.21 ו 12.32. מונוסודיום פוספט ובסיס מצומד שלה, פוספט דיודיום משמשים בדרך כלל כדי ליצור מאגרים של ערכי pH סביב 7, עבור יישומים ביולוגיים, כפי שמוצג כאן.
מה שהופך את המאגר הוא קצת יותר קשה לעשות מאגרים TAE ו- TBE. זה לא קשה מאוד, עם זאת. פשוט ממוצע. זה צריך לקחת בערך 10 דקות כדי להרים את המאגר הזה. הנה איך.
1. החלט על המאפיינים מאגר
לפני ביצוע מאגר, אתה צריך קודם לדעת מה molarity אתה רוצה שזה יהיה, מה נפח לעשות ומה ה- pH הרצוי. רוב המאגרים פועלים הכי טוב בריכוזים בין 0.1 מ 'ל 10 מ' ה- pH צריך להיות בתוך יחידת pH 1 של pKa בסיס חומצה / מצומד. לפשטות, חישוב מדגם זה יהיה 1 ליטר של חיץ.
2. קביעת היחס בין חומצה לבסיס
השתמש משוואת הנדרסון-Hasselbalch (להלן) כדי לקבוע איזה יחס של חומצה לבסיס נדרש לעשות חיץ של ה- pH הרצוי. השתמש בערך pKa הקרוב ביותר pH הרצוי ואת יחס יתייחסו בסיס חומצה בסיס מצומד המתאים pKa.
HH משוואה: pH = pKa + log ([בסיס] / [חומצה])
למאגר של pH 6.9, [Base] / [Acid] = 0.4898
תחליף ל [חומצה] ולפתור עבור [Base]
המולריות הרצויה של המאגר היא סכום של [חומצה] + [Base].
עבור מאגר 1 M, [בסיס] + [חומצה] = 1 ו [בסיס] = 1 - [חומצה]
על ידי החלפת זה לתוך משוואת יחס, משלב 2, אתה מקבל:
[חומצה] = 0.6712 שומות / L
לפתור עבור [חומצה]
באמצעות המשוואה: [Base] = 1 - [חומצה], ניתן לחשב את זה:
[Base] = 0.3288 שומות / L
3. מערבבים את חומצה בסיס צבירה
לאחר שהשתמשת משוואת הנדרסון, Hasselbalch כדי לחשב מה יחס של חומצה לבסיס נדרש למאגר שלך, להכין רק תחת 1 ליטר של פתרון באמצעות הכמויות הנכונות של פוספט מונוסודיום ופוספט דיסודיום.
4. בדוק את ה- pH
השתמש בדיקה pH כדי לאשר את ה- pH הנכון למאגר הוא הגיע. התאם מעט לפי הצורך, באמצעות חומצה זרחתית או hydroxide נתרן (NaOH).
.5 תקן את עוצמת הקול
לאחר pH הרצוי הוא הגיע, להביא את נפח המאגר ל 1 ליטר. ואז לדלל את המאגר לפי הצורך. חיץ זה יכול להיות מדולל כדי ליצור מאגרים של 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M או כל דבר בין לבין.
6. טיפים למאגר
זכור כי pKa לא נמדדת בקלות לערך המדויק. ערכים שונים במקצת עשויים להיות זמינים בספרות ממקורות שונים.
7. מה שאתה צריך
כדי להפוך את המאגר, תצטרך שלושה חומרים, ואילו החומרים הנותרים הם ציוד. החומרים הם פוספט מונוסודיום, פוספט דיסודיום, וחומצה זרחתית או הידרוקסיד נתרן כדי להתאים את ה- pH.
אתה גם צריך מטר pH בדיקה ו labware המתאים. זה כולל צנצנת volumetric, צילינדרים מדורגים, כוסות ומערבבים בארים.
לבסוף, תצטרך חמה hotplate.