כיצד להקפיא, יבש תרבות חיידקית (Lyophilization)

Lyophilization, או להקפיא ייבוש, הוא הליך מעבדה קצר

הקפאה ייבוש, המכונה גם lyophilization או cryodesiccation, הוא תהליך של הסרת מים ממוצר אחרי זה קפוא (ולאחר מכן להציב תחת ואקום) המאפשר קרח לשנות מן מוצק לאדים, מבלי לעבור שלב נוזלי. קרח (או ממיסים קפואים אחרים) מוסרים ממוצר באמצעות תהליך של סובלימציה ומולקולות מים מחוברים מוסרים בתהליך של desorption.

היסודות של Lyophilization

אחת הדרכים הטובות ביותר לאחסן חיידקים, פטרייתיים, שמרים או תרבות מיקרואורגניזם אחרים לתקופות זמן ארוכות היא להשתמש בתהליך של הקפאת ייבוש. זה הליך מעבדה קצר יכול להתבצע עם כל זמין מסחרית להקפיא- dry זה ישמור על אוסף התרבות שלך. בגלל lyophilization הוא הצורה המורכבת והיקרה ביותר של ייבוש, התהליך הוא מוגבל בדרך כלל עדין, חום רגיש חומרים בעלי ערך גבוה. חומרים שאינם פגומים על ידי הקפאה בדרך כלל ניתן lyophilized כך אחסון קירור מיותר.

תהליך זה יכול להימשך עד שלוש שעות, וכל עוד 24 שעות, לא כולל זמן הצמיחה התרבות.

תהליך שלב אחר שלב של Lyophilization

1. ראשית, לגדל תרבות לילה, או הדשא, של מיקרואורגניזם על LB או צלחת אחרת אגר מזין המתאים.

2. לאחר מכן, להכין צלוחיות סטרילית מכסה צנטריפוגה ידי מעוקר מראש, עם כובעים (פקקים גומי) הניח באופן חופשי על גבי. נייר תוויות נייר מודפס עם הזיהוי של התרבות בתוך הצינורות לפני החיטוי. לחלופין, להשתמש בצינורות עם כובעים המיועדים סטריליות .

1. הוסף 4 למאגר lyophilization מ"ל על הצלחת. במידת הצורך, התאים ניתן להשעות באמצעות מוט זכוכית סטרילית.

2. להעביר במהירות את ההשעיה תרבות על בקבוקונים מעוקרים. מוסיפים כ 1.5 מ"ל לכל בקבוקון. חותם עם כובע הגומי.

3. להקפיא את ההשעיה התרבות בתוך בקבוקונים על ידי הנחת צלוחיות ב -20 מעלות מקפיא Celcius.

1. לאחר התרבויות קפואות, להכין את המייבש להקפיא על ידי הפעלת אותו ומאפשר זמן טמפרטורה מתאימה התנאים ואקום לייצב. בצע זאת בהתאם להוראות היצרן עבור המותג הספציפי של מייבש הקפאה שבו אתה משתמש.

2. בזהירות, ו aseptically, במקום את הכדורים בקבוקון רופף על גבי צלוחיות, כך לחות יכול להימלט במהלך תהליך הייבוש להקפיא, ומניחים את צלוחיות לתוך תא הקפאה מייבש. החל את הוואקום לתא בהתאם להוראות היצרן.

3. אפשר זמן תרבות lyophilize לחלוטין (להתייבש). זה עשוי להימשך בין כמה שעות עד הלילה בהתאם לנפח של כל מדגם וכמה דוגמאות יש לך.

4. הסר את הדגימות מן החדר מייבש מייבש על פי הוראות היצרן מיד לאטום את הבקבוקים עם כובעי גומי, ולאחר מכן את צמרות crimp.

5. חנות אוסף lyophilized תרבות בטמפרטורת החדר.

מוצרים שאתה צריך

• מייבש כביסה
• חומרים מזינים או צלחות אגר מתאימות אחרות (ואינקובטור כדי לגדל תרבות)
• מוט זכוכית
• חיץ ליופיליזציה
• צלוחיות למעלה crimp עם פקקים גומי (ו crimper כדי להחיל את כובעי)
• מַקפִּיא

<sub>התייחסות:

SP מדע. עקרונות יסוד של ייבוש ההקפאה. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>